大肠埃希氏菌O104：H4多重PCR检测引物组和试剂盒

摘要

本发明公开一种大肠埃希氏菌O104：H4多重PCR检测引物组和试剂盒。所述检测O104：H4血清型和致病性基因的引物组，是由检测orfO104基因、fliCH4基因、stx1基因、stx2基因、eaeA基因和aggR基因的6个引物对组成。本发明建立一种基于普通PCR平台的多重PCR检测方法，利用分析设计得到的所述引物对，对待测样品提取的DNA进行多重PCR反应，反应结束后对PCR产物进行电泳分析，在确定样品是否为大肠埃希氏菌O104：H4血清型的同时，确定其含有的毒力基因种类，并且能够对潜在的EAEC和EHEC的新型重组模式进行有效的检测。

主权项

一种大肠埃希氏菌O104：H4多重PCR检测引物组，其特征在于，其是由检测血清型和致病性基因的引物对组成；其中，检测血清型和致病性基因的引物对是由检测orfO104基因、fliCH4基因、stx1基因、stx2基因、eaeA基因和aggR基因的6个引物对组成；所述检测orfO104基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；所述检测fliCH4基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示；所述检测stx1基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示；所述检测stx2基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示；所述检测eaeA基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示；所述检测aggR基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示。