| 主权项 |
一种生物防病型草坪专用栽培基质的制备方法，原料质量份如下：木糖醇渣 220～350份，油渣 120～200份，烟渣 150～300份，微生物发酵菌剂 0.5～5份，七水硫酸镁 30～40份，硫酸亚铁 5～10份，木霉菌菌剂 5～8份,芽孢杆菌菌剂 4～8份，蛭石 220～300份;所述的微生物发酵菌剂是EM复合菌剂;所述的木霉菌菌剂是木霉菌经过培养、发酵制备的液体木霉菌菌液。菌液有效菌含量为2╳108个/克～5╳108个/克；所述木霉菌菌种选自哈茨木霉（T.harzianum）或绿色木霉（T.viride）；所述的芽孢杆菌菌剂是芽孢杆菌经过培养、发酵制备的液体芽孢杆菌菌液；菌液有效菌含量为1╳109个/克～3╳109个/克；所述芽孢杆菌菌种选自枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）；步骤如下：（1）木霉菌菌剂的制备：将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂16克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入木霉菌菌种，放置在280C恒温培养箱中培养3天；培养结束后按常规接种量和方法转接至液体培养基中，液体培养基配方与斜面培养基相同，只是不加琼脂；280C、80个往复/分钟振荡培养4天，得种子液；再将种子液以5%～10%的接种量接入液体培养基中、280C条件下在发酵罐中培养6天，得木霉菌菌剂。菌液有效菌含量为2╳108个/克～5╳108个/克；（2）芽孢杆菌菌剂的制备：斜面种子：培养基配方：氯化钠 19.5克、氯化镁 25.9克、硫酸钠 3.3克、氯化钙 21.9克、蛋白胨 5.0克、酵母膏 1.0克、琼脂16克、水 1000克，pH 7.5；在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，斜面制作完后在无菌条件下接种木霉菌菌种，放置在300C恒温培养箱中培养2天；发酵液：按常规接种量将斜面种子接种到液体培养基中，液体培养基配方为 ：葡萄糖15.0克，甘露醇5.0克，蛋白胨10.0克，酵母膏1.0克，牛肉膏2.0克，氯化钠20.0克，碳酸钙 1克，水1000 克，pH 7.5；300C、80个往复/分钟振荡培养3天，得种子液；再将种子液以5～8wt%的接种量接入液体培养基中、300C条件下在发酵罐中培养4天，得芽孢杆菌菌剂；菌液有效菌含量为1╳109个/克～3╳109个/克；（3）按配比，取木糖醇渣、油渣、烟渣、微生物发酵菌剂，混合均匀；调整混合料的水分为55~60 wt %，堆制发酵腐熟，温度升至55oC计时，保持5~7天；翻堆，温度再次升至50oC计时，保持4~6天；如此操作再重复2次，共发酵25～40天；所得发酵料进行蒸汽灭菌，通入蒸汽，温度升至1000C时计时，保持6～10小时,得灭菌有机物发酵料； (4)按配比，取步骤（1）制备的木霉菌菌剂、步骤（2）制备的芽孢杆菌菌剂加入到步骤（3）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为55~60 wt %，28oC～30oC条件下堆制4～7天，得含有木霉菌和芽孢杆菌的混合物；（5）按配比，取七水硫酸镁、硫酸亚铁、蛭石，加入步骤（4）制备的含有木霉菌和芽孢杆菌的混合物中，混合均匀，晾干或35oC～40oC烘干，至水分含量27～30%，即得。 |
