一种富含硼酯的核壳式磁性复合微球的制备方法及其应用

摘要

本发明为一种可用于分离糖蛋白的核壳式磁性复合微球的制备方法及应用。本发明核壳式磁性复合微球的核为磁性四氧化三铁纳米粒子团簇，壳为交联的富含羧基的聚合物网络，然后羧基和氨基苯硼酯酰胺化反应进行表面修饰，通过表面固定的大量硼酯可以在生理条件下快速分离富集糖蛋白。首先制备柠檬酸钠稳定的磁性纳米粒子团簇，接着采用溶胶凝胶法，使磁簇表面修饰上活性的乙烯基官能团，然后通过回流沉淀聚合制备得到高磁响应性单分散的表面富含羧基的核壳式磁性聚合物复合微球，再用氨基苯硼酯与羧基进行酰胺化反应修饰上大量硼酯基团，最后进行糖蛋白的分离富集。本发明方法简单，过程可控，分离纯化糖蛋白的效率较高且能在生理条件下分离富集。

主权项

一种富含硼酯的核壳式磁性复合微球的制备方法，其特征在于所述核壳式磁性复合微球的核为磁性四氧化三铁纳米粒子团簇，壳为交联的富含羧基的聚合物网络，然后羧基和氨基苯硼酯酰胺化反应进行表面修饰，通过表面固定的大量硼酯可以在生理条件下快速分离富集糖蛋白；具体步骤如下： (1)．将1~20g六水合三氯化铁、1~50g醋酸盐和0.1~20g柠檬酸盐溶解在20~500mL乙二醇中，在100~200℃下机械搅拌0.5~5h，然后置于含有聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压反应釜中，将反应釜放置于100~300℃的烘箱中10~50h，取出，用自来水使其冷却至室温；用磁铁分离出产物磁簇，并用无水乙醇洗涤除去未反应的反应物，最后将产物磁簇分散在无水乙醇中，备用；(2)．将步骤(1)得到的磁簇100mg‑3g、20~400mL无水乙醇、5~100mL去离子水、0.5~10mL氨水以及0.2~10g带双键的硅烷偶联剂加入三口烧瓶中，在反应温度为50~100℃下机械搅拌10~40h，使磁簇表面修饰上活性的乙烯基官能团；反应结束后，用磁分离得到表面修饰有乙烯基的磁簇，并用无水乙醇除去过量的硅烷偶联剂；然后放入真空烘箱进行干燥；(3)．将步骤(2)得到的25~500mg得到的表面修饰有乙烯基的磁簇、0.1~5mL侧链带羧基的烯类单体、2mg~5g N, N’‑亚甲基双丙烯酰胺、1~80mg 2,2‑偶氮二异丁腈以及溶剂20~400ml乙腈加入50~1000ml单口烧瓶中，超声使其混合均匀；将烧瓶连接到装有精馏柱的回流装置上；从室温升温到沸腾状态，然后控制反应在90~150℃保持1~5h；反应结束后用磁分离，并用无水乙醇进行洗涤，得到表面带羧基的磁性复合微球；(4)．将0.1~10 g 氨基苯硼酯溶于100~2000 mL水中，然后加入0.1~10 g 氢氧化物调节体系pH值为8~13，取步骤(3)得到的表面带羧基的磁性复合微球加入到该溶液中，超声分散，之后加入0.1~10g EDC, 于20~120℃反应10~30 h；反应结束后用磁分离，并用去离子水进行洗涤，即得所需产品。