一种体外筛选叶下珠提取物抗乙肝病毒活性成分的毛细管电泳方法

摘要

本发明涉及一种体外筛选叶下珠提取物抗乙肝病毒活性成分的毛细管电泳方法。本发明所述的方法是将叶下珠提取物与乙肝病毒阳性血清温育后的溶液进行毛细管电泳分离，通过比较不同温育时间所得的电泳峰面积，从而筛选叶下珠提取物中抗乙肝病毒的活性成分。本发明所述的方法具有简单、快速、直观、高分离效率的特点，不仅可应用于体外筛选单个化合物抗乙肝病毒活性，而且可以应用于体外评价多个化合物之间有无协同抗乙肝病毒活性，因而在中草药抗乙型肝炎病毒和抗癌活性成分的快速筛选中有潜在的应用前景。

主权项

一种体外筛选叶下珠提取物抗乙肝病毒活性成分的毛细管电泳方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：A）称取从叶下珠提取物中分离得到的酚酸类化合物，加入HBsAg或HBeAg阳性血清，混合，酚酸化合物的质量与HBsAg或HBeAg阳性血清的体积比为5:1~10:1，用水定容后，将混合溶液于37 ℃培养箱内温育不同的时间，然后用滤膜过滤；B）依次用0.1～1.0 moL/L氢氧化钠、重蒸水、运行缓冲液冲洗毛细管2～5分钟，然后在－15～－25 kV的分离电压条件下，进行毛细管平衡处理10～20分钟；C）采用反向检测方式，以pH 5～10的10～50 mmol/L硼砂缓冲液为运行缓冲液，检测波长为200～250 nm，分离电压为－15～－25 kV，运行温度为15～30℃，进样压力为0.5 psi （1 psi=6894.76 Pa），进样时间5～10秒，分别对步骤A的混合液进行电泳分离；D）通过比较步骤A的混合液在不同温育时间所得的电泳峰面积，筛选叶下珠提取物中抗乙肝病毒的活性成分。