重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法

摘要

本发明提供了一种重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法以及一种L-天冬酰胺酶Ⅱ。重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法包括的步骤有：获得表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的重组大肠杆菌；培养种子液；发酵培养；获得L-天冬酰胺酶Ⅱ；其中发酵培养的步骤采取分步发酵培养。本发明重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法工艺简单、易于操作，并且产出量高、降低了生产成本。

主权项

一种重组大肠杆菌高效表达L‑天冬酰胺酶Ⅱ的方法，包括如下步骤：获得表达L‑天冬酰胺酶Ⅱ的重组大肠杆菌；将所述重组大肠杆菌接入培养基一中进行摇床培养，得到种子液；将所述种子液按总接种量的5%～12%接入培养基二中进行分阶段发酵培养；其中，所述分阶段发酵培养是先在0～7小时内通入无菌空气，搅拌,进行第一阶段培养；在8～32小时内通入无菌空气，搅拌，且温度以0.3～1℃/h梯级降低至32℃进行第二阶段培养；在上述分阶段发酵培养过程中还添加有乳糖诱导剂，所述乳糖诱导剂在所述培养基二中的浓度为3～5g/L。