发明名称 蚂蚁蛆虫蛋白质的分离工艺
摘要 蚂蚁蛆虫蛋白质的分离工艺,涉及蛋白质的分离工艺。本发明的蚂蚁蛆虫蛋白质的分离工艺是通过以下技术方案实现的:(1)以蚂蚁蛆虫为原料提取蚂蚁蛆虫蛋白质;(2)用分离机分离蚂蚁蛆虫蛋白质;(3)微滤与超滤处理;(4)超声驻波液相制备色谱或凝胶柱纯化出蚂蚁蛆虫蛋白质;(5)纯化的蚂蚁蛆虫蛋白质真空冷冻干燥并包装。本工艺分离的蛋白质成份明确,一致性好,抑菌及杀菌能力较高,可以分离纯化蚂蚁蛆虫蛋白质的含量达92.1~95.2%。
申请公布号 CN102827264B 申请公布日期 2013.12.11
申请号 CN201210315570.0 申请日期 2012.08.31
申请人 哈尔滨工业大学 发明人 徐华民;赵荣华;赵艳琨;徐萌
分类号 C07K14/435(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I 主分类号 C07K14/435(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 蚂蚁蛆虫蛋白质的分离工艺,其特征在于所述分离工艺如下:(1)以蚂蚁蛆虫为原料提取蚂蚁蛆虫蛋白质,所述蚂蚁蛆虫按照如下步骤制备:1)蚂蚁粉碎至粉末状,2)与水混合搅拌成蚂蚁糊状物;3)蚂蚁糊状物高温杀菌;4)谷物糠麸及蚂蚁糊状物用中药处理形成虫卵培养液,所述虫卵培养液由100g谷物糠麸、蚂蚁糊状物0.2‑50g、丁香粉0‑10g、苍术粉0‑5g、藿香0‑8g、0‑20g木香粉和0‑5.0g草乌粉混合而成,保持温度30‑55℃、时间48‑240h,生成虫卵;5)幼蛆培殖:配制幼蛆培养液,所述幼蛆培养液由1‑100g蚂蚁糊状物、0‑200g蛋白胨、5‑10g酵母抽提粉、0‑10g木香粉、0‑10g藿香、0‑30g苍术粉、0‑20g中药丁香粉、2‑10gNaCl或KCl、0‑100g大豆分离蛋白、0.5‑1.0L纯净水混合而成,分装于三角烧瓶中,灭菌后分别装入前面培殖的虫卵,摇床1 ‑100r/min,培养12‑48h,生成含蚂蚁幼蛆的培养液;6)蛆虫培育:配制蛆虫培育液,所述蛆虫培育液由500‑3000g蚂蚁粉、10‑80g酵母抽提粉、0.01‑0.1gNaCl、0‑1.0gKCl、0‑0.8gMgCl2、0.01‑0.08gCaCl2、0‑0.5gMgSO4、20‑100gNa2HPO4、0‑5.0gK2SO4、0‑5.0g尿素混合均匀并加入10‑15L水,加入含幼蛆培养液进行培育,培育参数:pH=5.5‑8,搅拌速度1‑30r/min,温度25‑55℃,通气量5.0 ‑20L/min,时间72‑168h,蚂蚁蛆虫由乳白色变为乳黄色,培育过程完成;7)将培育液和培育出的蚂蚁蛆虫放入分离机中进行虫液分离,用纯净水洗涤蚂蚁蛆虫,并用热水喷淋灭活;(2)用分离机以8000‑16500r/min连续分离蚂蚁蛆虫蛋白质,收集液相;(3)液相泵入膜孔径0.05‑0.2μm微滤机过滤再泵入膜孔径20‑100nm超滤机超滤处理;(4)超滤液加入溶剂体系,泵入超声驻波液相制备色谱中,超声驻波声强0.2~1.5kw,频率245‑500kHz,流量100~500ml/min,紫外检测器波长280nm,连续纯化分离出蚂蚁蛆虫蛋白质;所述溶剂体系由质量比16%PEG1000‑12.5%K2HPO4组成或由正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水按照8﹕2﹕5﹕5体积比组成;(5)纯化的蚂蚁蛆虫蛋白质真空冷冻干燥并包装。
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