发明名称 一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法
摘要 本发明涉及一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法,步骤为:首先准备一系列表面张力已知的不同液体,接着分别取上述液体注入离心管内,再把细胞悬浮液注入上述表面张力不同的液体中,并采用试管搅拌器充分混合液体和细胞悬浮液;之后,静置离心管10分钟,再采用离心机将上述1.5mL离心管内的细胞悬浮液在1000rpm下离心1分钟,加速细胞在液体中的聚集和沉降;之后,取出离心管,在离心管架上静置2分钟,采用移液器分别在各1.5mL离心管中取出200μL上清液体,依次注入96孔板的每个孔内;然后采用微孔板分光光度计,测量孔板内上清液体的光密度,其光密度最大时所对应的液体表面张力即可视作细胞的表面自由能。
申请公布号 CN103439228A 申请公布日期 2013.12.11
申请号 CN201310418010.2 申请日期 2013.09.13
申请人 北京科技大学 发明人 张欣茹;姜泽毅;张欣欣;左燚;丑爱辉;陈亮
分类号 G01N13/00(2006.01)I;G01N13/02(2006.01)I 主分类号 G01N13/00(2006.01)I
代理机构 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 代理人 皋吉甫
主权项 一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法,其特征在于,该方法可直接且快速高通量的测量细胞的表面自由能,具体包括以下步骤:配置一系列已知表面张力的溶液,溶液的表面张力范围要涵盖细胞可能的表面能,同时将所配置的溶液按表面张力从小到大依次排列,分别编号;取5 mL的细胞悬浮液放入15 mL离心管内,采用0.1 M, pH=7磷酸缓冲液离心‑清洗3次,再将清洗后的细胞再悬浮于新鲜培养液中,并同时把细胞悬浮液浓缩到1 mL,放于1.5 mL离心管内,最后,将再悬浮处理后的细胞悬浮液采用试管搅拌器涡旋搅拌20秒,接着超声震动2 min, 以使细胞在液体中均匀分布,并完全分散;准备若干个1.5 mL的离心管,将所配置的已知表面张力的若干个溶液分别采用移液器移取1 mL放于标好号的离心管中;将步骤(2)处理后的5 μL细胞悬浮液采用移液器注入放有不同表面张力溶液的1.5 mL离心管内,采用试管搅拌器涡旋搅拌30 s 后,将离心管依次放在离心管架上;采用离心机将离心管内的细胞悬浮液离心分离,取离心后离心管内上清液体,采用移液器依次移取200 μL,依次注入96孔板;采用微孔板分光光度计测量96孔板内上清细胞悬浮液的光密度,光密度最高时所对应的液体的表面张力即为细胞的表面自由能。
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