一种从发酵液中纯化提取冠菌素的方法

摘要

本发明公开了一种从发酵液中纯化提取冠菌素的方法。本发明所提供的从发酵液中提取纯化冠菌素的方法，包括如下步骤：1)取发酵液的上清液；2)将步骤1)得到的上清液用大孔吸附树脂柱进行分离，得到粗提冠菌素；3)将粗提冠菌素用硅胶柱进行分离，得到纯化的冠菌素；所述发酵液为发酵菌制备冠菌素时产生的发酵液，所述发酵液为发酵容器内的所有物质。本发明方法工艺简单，收率高，生产成本低，对COR的结构和活性没有任何影响，而且耗能低，污染小，完全适应工业化生产的要求。

主权项

一种从发酵液中提取纯化冠菌素的方法，包括如下步骤：1）取发酵液的上清液；2）将步骤1）得到的上清液用大孔吸附树脂柱进行分离，得到粗提冠菌素；3）将粗提冠菌素用硅胶柱进行分离，得到纯化的冠菌素；所述发酵液为发酵菌制备冠菌素时产生的发酵液，所述发酵液为发酵容器内的所有物质；所述步骤2）中，所述分离方法包括如下步骤：将所述上清液流过大孔吸附树脂柱以进行吸附，再用洗脱缓冲液进行洗脱，收集洗脱液；其中，所述上清液的速度为10升/小时—15升/小时；所述步骤3）中，所述分离方法包括如下步骤：将所述粗提冠菌素流过硅胶柱以进行吸附，再用洗脱缓冲液进行洗脱，收集洗脱液；其中，所述洗脱缓冲液的流速为0.5ml/min；所述步骤2）中，所述洗脱缓冲液为如下中的至少一种：乙醇、丙酮、乙醚、石油醚、正己烷和乙酸乙酯；所述步骤3）中，所述洗脱缓冲液为由乙酸乙酯：甲醇：水：乙酸=10:2:0.5：0.5的体积比组成的混合物；所述步骤2）中，所述大孔吸附树脂为非极性的大孔吸附树脂，所述大孔吸附树脂的比表面积为500‑920m2.g‑1；所述步骤3）中，所述硅胶的粒径为100‑300目；所述步骤2）中，所述大孔吸附树脂为HPD系列的大孔吸附树脂、YPRII型大孔吸附树脂或HZ系列的大孔吸附树脂；所述步骤3）中，洗脱缓冲液的量3倍柱体积，收集第2个柱体积的洗脱液。