一种海蜇降压肽的制备方法

摘要

一种海蜇降压肽的制备方法，包括：对海蜇的去金属离子处理，并依次进行匀浆、酶解、灭酶、浓缩、超滤及冷冻干燥等步骤，最终获得纯化的海蜇降压肽粉末。本方法结合现代酶工程技术，提供了一种新的高效的海蜇降压肽的生产途径，提高了海蜇资源的利用效率，具有操作简单、提取率高、产物活性保存好的特点，海蜇降压肽生产成本降低。其充分利用海蜇丰富的蛋白质资源，通过去金属离子处理将海蜇体内各种金属离子基本去除干净，使后续酶解和应用更加安全。用高血压SHR大鼠模型进行海蜇降压肽降压活性试验结果显示：本发明组与空白对照组相比差异有显著性，本方法制备的海蜇降压肽具有与阳性对照卡托普利相似的降血压活性。

主权项

一种海蜇降压肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、去除金属离子，将盐渍海蜇和超纯水按照1:1‑2的比例混合，采用超纯水机抽取去离子水去除海蜇体内的各种金属离子；（2）、将去除金属离子后的海蜇沥干水分，破碎并搅拌，然后用匀浆机以4500‑6000r/min匀浆8‑20分钟；（3）、对步骤（2）得到的海蜇浆料按照8000U/g标准加入中性蛋白酶制作酶解体系，或将该海蜇浆料在干燥机内45‑55℃通风干燥2小时制成海蜇粉末再将海蜇粉末加入8000U/g中性蛋白酶配置成混悬液，在温度40‑60℃下，酶解1‑2小时；酶解后的酶解液送入发酵罐进行灭酶灭菌，将灭酶灭菌后的酶解液冷却至室温，离心，收集上清液；将该上清液用滤纸过滤后置于旋转蒸发仪中进行真空浓缩，得体积为原体积1/4的浓缩液； （4）、在步骤（3）所得浓缩液中加入体积分数为95%的乙醇溶液直至体系中乙醇体积分数达50%，静置，离心，收集上清液；及（5）、取步骤（4）所得的上清液用阻抗值不低于18的超纯水稀释50倍，加入超滤系统的超滤杯中，安装截留分子量为2.5kDa的超滤膜包，进行超滤，收集滤出液并浓缩，冷冻干燥后得成品；步骤（5）中超滤压力为20‑30psig；其中，所述步骤（1）去除金属离子步骤包括：1）从超纯水机抽取去离子水，所述去离子水阻抗值不低于10，按照盐渍海蜇比超纯水为1:2的质量比将两者混合，搅拌30分钟；2）再从超纯水机抽取去离子水，所述去离子水阻抗值不低于15，按照盐渍海蜇比超纯水为1:2的质量比将两者混合，搅拌30分钟；及，3）三次从超纯水机抽取去离子水，所述去离子水阻抗值不低于18，按照盐渍海蜇比超纯水为1:1的质量比将两者混合，搅拌15分钟。