一种诱导博落回花药离体单倍体胚胎发生及植株再生的方法

摘要

本发明公开了一种诱导博落回花药离体单倍体胚胎发生及植株再生的方法，属于植物组织培养技术领域。方法包括：(1)培养基的配制；(2)体细胞胚胎发生；（3）体细胞胚胎的萌发与成苗；(4)组培苗的驯化与移栽等。本发明以博落回的花药作为外植体所建立的组培方法，能够快速、高效、大规模的生产高质量的博落回单倍体植株，经过田间筛选后可以直接作为育种材料，应用于育种和基因组学的研究。

主权项

一种诱导博落回花药离体单倍体胚胎发生及植株再生的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）外植体的采取与消毒：取处于盛花期的，长度在2‑12mm的博落回花蕾消毒后，将花蕾轻轻拨开，拔取雄蕊，切除花丝，留下花药作为外植体，备用；2）胚性愈伤组织的诱导培养：将步骤1）消毒的花药接种到BLCG+2，4‑D0.5～3.0mg/L+6‑BA0.5mg/L培养基上，在温度25±1℃，光照强度1000～3000Lx，光照时间16～18h/d的条件下进行胚性愈伤组织的诱导，培养30～40d后得到愈伤组织；3）花药胚状体诱导培养：将步骤2）得到的愈伤组织转接后形成胚状体；4）体细胞胚胎萌发与成苗培养：将步骤3）得到的胚状体转接后形成生根的完整植株；5）再生苗的移栽与培养：将生根苗移栽到炼苗基质中炼苗后，再进行正常的水肥管理。