一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法

摘要

本发明公开的免疫缺陷小鼠模型的建立方法，包括如下步骤：(1)构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA；(2)步骤(1)构建出的DNA纯化后经逆转录酶经体外转录为mRNA；(3)mRNA纯化并冻存于RNAase free的超纯水中；(4)在SPF级别饲养条件下，饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠；(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管，收集受精卵；(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内；(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内，假孕雌鼠开始培育第二代；(8)建立稳定的缺陷小鼠品系。本发明的优点，能够得到完全对异体移植无免疫排斥作用的小鼠模型用于试验。

主权项

一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)利用TEALN基因敲除术，构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA；(2)将步骤(1)构建出的DNA纯化，纯化后使用SP6逆转录酶经体外转录为mRNA；(3)将步骤(2)得到的mRNA纯化，并冻存于RNAase free的超纯水中，以备显微注射之用；(4)在SPF级别饲养条件下，饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠；(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管，用质量浓度为0.9％的生理盐水清洗后，放在显微镜下观察，挑取并收集受精卵；(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内，受精卵将mRNA翻译成蛋白，蛋白结合到免疫相关基因，破坏免疫相关基因序列，从而使免疫相关基因的功能丧失。(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内，假孕雌鼠开始培育第二代；(8)将步骤(7)获得的免疫缺陷小鼠自交，扩大种群数量，建立稳定的缺陷小鼠品系。