一种检测水产品中副溶血弧菌的试剂盒及方法

摘要

一种检测水产品中副溶血弧菌的试剂盒及方法，该试剂盒包含：无菌去离子水，PCR反应液、TaqDNA聚合酶、溴化乙锭DNA染料、溴酚蓝上样缓冲液、标准品及对照品；检测方法是：首先采集样品，进行增菌培养，培养后提取DNA，制备PCR反应管，PCR仪上，分别进行PCR扩增，得PCR扩增产物进行检测结果判定。优点是：该试剂盒可以用于副溶血弧菌的快速检测、流行病学调查、药物疗效监测等方面。与现有的检测方法相比，该方法使用方便、可靠性好、检测周期短、灵敏度高、特异性强、成本低廉、操作步骤简单，适用于高通量操作、标准化操作，对提高食品安全水平具有重要意义。

主权项

一种检测水产品中副溶血弧菌的试剂盒，其特征是：该试剂盒包含：无菌去离子水，PCR反应液、Taq DNA聚合酶、溴化乙锭DNA染料、溴酚蓝上样缓冲液、标准品及对照品；所述PCR反应液含有PCR反应缓冲液、MgCl2、脱氧核糖核苷三磷酸、检测用引物；所述检测用引物为如下4条引物的混合物：外引物上游：GGAATTCGCAGTGATCGCCGCTTGAG；外引物下游：CGCGTCGACAGCATCGCGGTTATAGG；内引物上游：CGCAGAACTGATAGGAAACGGCAATG；内引物下游：TGATGCGTTAGCGGAACAAGGTG；所述标准品为含有以副溶血弧菌基因组DNA为模板、以内引物上游和内引物下游为引物进行PCR扩增后得到的扩增产物的重组质粒，其扩增产物序列见序列表SEQ ID No. 6； 对照品分为阴性对照品和阳性对照品，阴性对照品为无菌去离子水，阳性对照品为内引物上游和内引物下游为引物的扩增产物经凝胶电泳纯化回收得到的DNA片段，其扩增产物序列见序列表SEQ ID No. 6。