一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法

摘要

本发明的一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法涉及一种生物表面活性剂的生产方法，是由枯草芽孢杆菌ACCC01430经发酵培养制得，其具体步骤如下：将斜面固体枯草芽孢杆菌菌种接入摇瓶培养，温度为35±2℃、120转/分震荡培养12～16小时，得到摇瓶菌种；将制得的摇瓶菌种转接入装有培养基的一级发酵罐中，制得一级发酵菌种；将一级发酵菌种转接入装有培养基的二级发酵罐中，制得二级发酵菌种；将二级发酵菌种转接入装有培养基的三级发酵罐中，发酵培养24～26小时，即制得脂肽生物表面活性剂。本发明的一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其脂肽含量达到7～10%g/L，并取得了工业化生产实验的成功，发酵周期缩短到48小时，大大降低了生产成本；本发明首次将工业化生产的脂肽发酵液应用现场，将其注入地下油层，使原来难以注水的区块水顺利注入，并且使原油采收率提高了5～12％；效率高。

主权项

一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其特征在于：该脂肽生物表面活性剂是由枯草芽孢杆菌ACCC01430经发酵培养制得，其具体步骤如下：A、将斜面固体枯草芽孢杆菌ACCC01430菌种接入摇瓶培养，摇瓶中每500ml培养基接入1环菌种,温度为35±2℃、120转/分震荡培养12～16小时，得到摇瓶菌种； B、一级发酵培养：将A步骤制得的摇瓶菌种转接入装有培养基的一级发酵罐中，摇瓶菌种与培养基的体积比为1：19～20,在温度为35±2℃、pH6～7.5、通风比1: 0.3～0.5及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～14小时，得到一级发酵菌种；C、二级发酵培养：将B步骤制得的一级发酵菌种转接入装有培养基的二级发酵罐中，一级发酵菌种与培养基的体积比为1:10，在温度为35±2℃、pH 6～7.5、通风比1: 0.3～0.5及搅拌速度为100～110转/分的条件下发酵培养10～14小时，得到二级发酵菌种；D、发酵培养：将C步骤制得的二级发酵菌种转接入装有培养基的三级发酵罐中，二级发酵菌种与培养基的体积比为1：10，在温度为35±2℃、pH 6～7.5、通风比1: 0.3～0.5、搅拌速度为80～100转/分，在菌体处于衰落期进行补料，发酵培养24～26小时，得到脂肽生物表面活性剂；其中，所述的摇瓶及各级发酵罐培养基配方是：米糠油2～5%、尿素0.2～1.5%、糖蜜10～15%、KCl 0.05～1.0%、KH2PO4  0.05～1.2%、K2HPO4 0.05～1.5%、酵母膏0.005～0.1%、复合微量元素0.005～0.01%，余量为水，pH为6.0 ‑7.5；所述的复合微量元素为硫酸锌1.1 g/L、氧化锡 1.3 g/L、氯化锰 1.0 g/L、 硫酸铜 1.0 g/L、氧化钴 1.0g/L及溶剂水复配而成；步骤D中所述的补料是米糠油，每次补料量按发酵液总体积量的3%～5%补加。