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一种镰刀菌拮抗菌的筛选方法，其特征在于：采用平板两步培养法，即首先在营养平板上分离细菌，然后喷雾镰刀菌的孢子液，继续于28℃条件下培养，周围出现抑菌圈的细菌即为镰刀菌拮抗菌；具体方法和步骤如下：a) 把不同来源的土壤样品或植株样品，放入无菌水中震荡混匀后，配制成10‑3,10‑5,10‑7,10‑9的稀释液，把不同稀释度的稀释液分别涂布于含有营养培养基的平板上，每个稀释液重复两次，将涂布好的培养皿倒置放于28℃条件下培养48小时以上，挑涂布培养后长有细菌的平板备用；b) 将镰刀菌在PDA培养基上活化后，接入绿豆汤培养基中，25℃光照培养一周后，用无菌纱布过滤后即成镰刀菌孢子液；c) 将镰刀菌孢子液放入无菌的喷壶内，对着经过涂布培养长有细菌的平板快速喷雾接种镰刀菌孢子液，正置1小时后倒置放于28℃培养箱内培养48小时以上；d) 观察接种镰刀菌孢子液后培养48小时后的平板，挑选出现抑菌圈的细菌；e) 把具有抑菌圈的细菌在营养培养基平板上进行划线纯化，28℃培养箱内培养48小时后，观察菌落的形态，颜色和大小性状，对具有性状不一样的菌落，分别按同样的方法再次进行划线纯化，直至每个平板上的菌落呈现相同的颜色，大小和形状，即为纯化好的细菌； f) 拮抗菌的复筛，将纯化好的细菌点种于营养培养基平板上，28℃培养箱内培养48小时后，喷雾镰刀菌孢子液后，于28℃培养48小时后观察，有抑菌圈的为镰刀菌拮抗菌。 |
