| 摘要 |
1. Способ молекулярно-генетической идентификации стерильности/фертильности пыльцы подсолнечника, включающий анализ тотальной ДНК исследуемых образцов на наличие/отсутствие митохондриального гена orfH522 и маркерной последовательности ядерного гена Rf1 с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с использованием первой пары праймеров: agtagcccgttccgtgtttatgga и ctttctatttgggtcatcgccgga, идентифицирующей ген orfH522 цитоплазматической мужской стерильности пыльцы (ЦМС РЕТ1) и второй пары праймеров: ggcatgatcaagtacataagcacagtc и tatgtacgggaatgagctccggtt, идентифицирующей маркерную последовательность гена Rf1-восстановителя фертильности пыльцы ЦМС РЕТ1, при этом образец определяют как фертильный, если а) присутствует и orfH522 и маркер гена Rf1, б) отсутствует orfH522 и присутствует маркер гена Rf1, в) отсутствует и orfH522 и маркер гена Rf1, и образец определяют, как стерильный, если присутствует orfH522 и отсутствует маркер гена Rf1.2. Способ по п.1, в котором продукты реакции амплификации разделяют электрофоретически в 2% агарозном или полиакриламидном геле с бромистым этидием.3. Способ по п.1, в котором результаты ПЦР анализируют и регистрируют с помощью гельдокументирующей системы GelDoc 2000 (BioRad, USA).4. Диагностический набор для молекулярно-генетической идентификации стерильности/фертильности пыльцы подсолнечника, включающий первую пару праймеров: agtagcccgttccgtgtttatgga и ctttctatttgggtcatcgccgga, идентифицирующую ген orfH522 и вторую пару праймеров: ggcatgatcaagtacataagcacagtc и tatgtacgggaatgagctccggtt, идентифицирующую маркерную последовательность гена Rf1-восстановителя фертильности пыльцы ЦМС РЕТ1.5. Применение способа по п.1 в селекционной практике.6. Применение по п.5 для определения генетической чистоты ЦМС-линий.7. При |
