| 摘要 |
Sposób wytwarzania oligorybonukleotydów zawierajacych 5-taurynometylourydyne lub 5-taurynometylo-2-tiourydyne, polega na poddaniu zloza CPG, zawierajacego przylaczona adenozyne, detrytylacji, nastepnie kondensacji z jednostka monomeryczna uzyta w postaci roztworu w acetonitrylu, w obecnosci aktywatora, reakcji acylowania nieprzereagowanych grup 5'-hydroksylowych, utlenieniu fosforynu do fosforanu, powtórzeniu opisanych wyzej operacji poczawszy od procesu detrytylacji az do osiagniecia wymaganej dlugosci oligorybonukleotydu, detrytylacji ostatniej dolaczonej jednostki monomerycznej, odblokowaniu oligomeru i odcieciu od zloza, straceniu nastepnie oczyszczaniu odblokowanego oligorybonukleotydu technika wysokosprawnej chromatografii cieczowej oraz odsoleniu otrzymanego oligorybonukleotydu. Sposób charakteryzuje sie tym, ze jako hipermodyfikowane jednostki monomeryczne stosuje sie 3'-O-amido-fosforyny 5-taurynometylourydyny lub 5-taurynometylo-2-tiourydyny, o wzorze 1, w którym X = O lub S. Jako uklad utleniajacy w syntezie oligorybonukleotydów stosuje sie roztwór jodu w mieszaninie tetrahydrofuran/woda/pirydyna, zas w etapie odblokowania oligomeru najpierw usuwa sie grupy ?-cyjanoetylowe z funkcji fosforanowych dzialajac mieszanina trietyloaminy i acetonitrylu, nastepnie usuwa supernatant, zloze suszy sie pod próznia, zalewa roztworem alkoholu etylowego nasyconego gazowym amoniakiem i pozostawia w temperaturze pokojowej, usuwa supernatant znad zloza i odparowuje pod próznia, pozostalosc rozpuszcza sie w N-metylo-2-pirolidonie, po czym odblokowuje sie w oligomerze jednoczesnie grupy 2'-hydroksylowe i grupe sulfonowa dzialajac trifluorowodorkiem trietyloaminy w temperaturze pokojowej. Wynalazek obejmuje takze otrzymywanie hipermodyfikowanych jednostek monomerycznych. |
