烟草及烟草制品中20种农药残留的GC-MS/MS测定方法

摘要

一种烟草及烟草制品中20种农药残留的GC-MS/MS测定方法，其特征在于：将待测样品经水浸润后，加入乙腈和内标物，然后涡旋提取、盐析分层，再加入甲苯进行液液萃取，取上清液经分散固相萃取（d-SPE）后,以气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）进行测定的方法。本发明方法具有如下优良效果：⑴以水浸润样品，提高了随后加入的有机溶剂乙腈对农药目标物的萃取效果。⑵在加入无水硫酸镁之前，预先冷冻处理，从而避免了无水硫酸镁在除水过程中的剧烈放热而导致部分目标物的热降解。⑶在萃取盐析之后的样品萃取液中加入甲苯，得到的萃取液比单独用乙腈时的颜色要浅，实际对萃取液起到了稀释并有部分净化除杂的作用。

主权项

一种烟草及烟草制品中20种农药残留的GC‑MS/MS测定方法，其特征在于：将待测样品经水浸润后，加入乙腈和内标物，然后涡旋提取、盐析分层，再加入甲苯进行液液萃取，取上清液经分散固相萃取（d‑SPE）后,以气相色谱‑串联质谱法（GC‑MS/MS）进行测定的方法，具体步骤如下：a、内标溶液的配制：配制TPP（三苯基磷酸酯）浓度为20 μg/mL的丙酮溶液；b、称取样品：称取2.0 g烟草样品于50 mL具塞离心管中； c、加水浸润样品：准确加入10 mL水，浸润10 min；d、振荡萃取：准确加入10 mL乙腈和50 μL内标溶液，在漩涡混合振荡仪上以2000 rpm涡旋1 min；放入4 ℃冰箱冷冻10 min；e、盐析分层：加入盐析试剂包，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡1 min，所述盐析试剂包由4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠组成；f、液液萃取：加入5 mL甲苯，在漩涡混合振荡器上以2000 rpm的转速振荡2 min，静置；g、取上清液1.5 mL于2 mL离心管中，加入150 mg无水硫酸镁和40 mg PSA（N‑丙基乙二胺），在漩涡混合震荡仪上以2000 rpm振荡2 min，在高速离心机上以9000 rpm离心3 min，取上清液待用；h、准备标准工作溶液：分别称取0.010 g各种农药标准品，置于同一10 mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，然后用甲苯稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的标准工作溶液； i、准备基质配标工作溶液：对空白烟草样品按相同的前处理方式b‑g过程处理后，分别取1 mL上清液氮气吹干后，用1 mL不同浓度梯度的农药标准工作溶液进行复溶；j、GC‑MS/MS测定:吸取配制好的不同浓度的基质配标工作溶液，过0.22 μm有机滤膜后，注入GC‑MS/MS；采用的色谱条件为：色谱柱：DB‑35MS弹性石英毛细管色谱柱30 m×0.25 mm×0.25 μm；进样口温度：250 ℃；程序升温：初始温度50 ℃，保持1 min后以25 ℃/min升至150 ℃；然后以5 ℃/min升至260 ℃，保持5 min；最后以10 ℃/min升至280 ℃，保持10 min；不分流进样，不分流时间1 min；载气：氦气，纯度为99.999%；恒流模式，流速为1.0 mL/min；进样量：1 μL；采用的质谱条件为：EI电离模式，电离能70 eV；灯丝电流：50 μA；离子源温度：250 ℃；传输线温度：280 ℃；Q2碰撞气：氩气，纯度99.999%，碰撞池压力为1.0 mTorr；溶剂延迟5 min；扫描方式 ：多反应监测（MRM）；k、农药残留测定结果的计算:以内标法进行农药目标物的定量分析，即以农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标TPP的二级选择离子峰面积比，代入标准曲线，求得样品中的敌菌丹、内吸磷‑O、杀虫脒、内吸磷‑S、八甲磷、自克威、棉隆、异丙甲草胺、除草定、敌草胺、烯效唑、乙酯杀螨醇、腈菌唑、稻瘟灵、草枯醚、丁硫克百威、溴苯磷、三氯杀螨砜、丙硫克百威、精喹禾灵的含量。