琼胶酶基因agaAL及其编码蛋白和应用

摘要

本发明公开了一种来源于黄杆菌科的新菌株HQM9的琼胶酶基因agaAL及其克隆、表达、纯化与应用。以HQM9的基因组DNA为模板，以PCR方法获得agaAL的全长基因，其核苷酸序列全长1026bp，编码341个氨基酸。利用体外重组表达得到琼胶酶蛋白，该重组琼胶酶rAgaAL具有很高的酶活性，可达到13.6U/mg，其最适底物浓度为1.2%，最适温度为55℃，最适pH为8.0，反应液中添加10nm的K+对rAgaAL的酶促反应有促进作用，而当添加Zn2+、Mn2+、Cu2+、Pb2+、Co2+时酶促反应都受到极大程度的抑制。利用异源表达技术得到的琼胶酶降解琼脂，可以产生多种聚合度的寡糖，具有一定的工业化生产前景。

主权项

一种β‑琼胶酶基因agaAL，其特征在于，具有如下的核苷酸序列：ATGAAAAAAATCGCAATATTATTTTTATGTATTTTTGGATATTCCTGTTCTAACGATGATAGTACGCCACCTCCTAGACAACCAAGCCCAGAGGTTATTGATTCTGGTGAGGAAAAATCAAACCCCGACCCTGAGGAAGAGGGTTCCATGACAGAACCAGAGGAAATACCTCAGCCAATACCAGAAACAGTTGAACCTATAGATGTTGTTTTTGATATTCCAACACCACCCGAGGGTAAAAAATGGGAAATTGTACCAGAACTTACAGATGAATTTAACGGCACTTTTGATACCGATAAATGGTTTAAACCTTTGTGGAATTATGGGGTTCCTGTTCAAATGGTGGCGCAAAATTCAGGAGTTTCTGATGGTAGATTATGGATTATGGCTACATTAGATAATACAAATCCTGATGGAAGATGGTTTAGAACTTCTCGAGTGCAATCCAGAGCGCAAATAAATTATCCAATGTACACGGAATCAAAAATAAAAACAGCACATATTTCTGCCTATAATACTTTTTGGTTAAATAATGGAAATATTGATGATCGTGATGAAATTGATGTCATTGAAAATAATTCAAAACCCTCTTGTAACTGTCAACCAGATTTTCCGTGGCAAATGAATTCTCAATATTTCCAGGTAAATTCAGCTGCAAGTCCTAAAGAAGTAAGGAATCATGGTAATTTTGATAATAGAGCTCTGTCAGATGCAAATCCATTAAAAGGAGTAAAGTGGAATGAGGAGTATCATGTGTTTGGTGTATGGTGGAAGGATGCCAAAAATGCACAGTTTTATTTAAATGGAGAAGAAGCTGGTAGTGTTGTGTTTGGCGAGCAGCGTTTTGACAACGAACCGTTTATTGAAGGCAGGGCGTTTACGAGAAATTTAAATATTATATGGGATTTATGGACAGTTGATCAGCCTTGGCTTGGAGGATTGCCTCCAAAATCGGACTTATCTGATAAAACTATAAATACTATGAGAGTTGATTGGATTCATACTTATAAATTAACTGATGAATAG。