| 摘要 |
Способ получения форм картофеля сорта Скороплодный in vitro, устойчивых к температурным стрессам и к возбудителю фитофтороза, заключающийся в том, что стеблевые и листовые экспланты, вычлененные из тридцатидневных асептических растений исходного сорта помещают в чашки Петри с жидкой средой следующего состава:и прединкубируют в течение 18-24 ч и температуре 22-24° С, затем вносят пипеткой 300 мкл на одну чашку ночной суспензионной культуры агробактерии, несущей плазмиду с геном ацил-липидной Δ9 десатуразы из цианобактерии Synechococcus vulcanus, кокультивируют с агробактериальной суспензией в течение 15-30 мин при периодическом встряхивании, обсушивают между листами стерильной фильтровальной бумаги и помещают на другие чашки Петри с аналогичной средой и посткокультивируют в течение 18-24 ч при температуре 22-24°С на рассеянном свету, затем экспланты таким же образом обсушивают и переносят в чашки Петри с аналогичной средой с добавлением 7 г/л агара и 800 мг/л цефотаксим сульфата и инкубируют в течение 5-7 суток на рассеянном свету при 22-24°С, затем переносят на регенерационные среды состава:* Добавлять после автоклавированияи культивируют в течение 10-14 суток при 22-25°С и освещенности 6000-10000 лк, затем культивируют на аналогичной среде с цефотаксимом 500 мг/л и канамицин сульфатом 15 мг/л 3 пассажа по 21 дню, затем 1 пассаж без канамицина сульфата и снова 3 пассажа с канамицином, при появлении регенерантов размером не менее 10 мм их срезают и переносят на селективную среду состава:*Добавлять после автоклавирования,затем проводят первый этап отбора: срезанные регенеранты культивируют на среде МС с 50 мг/л канамицин сульфатом в течение 30-45 дней при пр |
