发明名称 |
一种优秀冰雪运动员血液cDNA文库及其构建方法 |
摘要 |
本发明涉及优秀冰雪运动员血液cDNA文库以及其构建方法,其中利用优秀冰雪运动员血液样品作为材料,通过提取总RNA、合成双链cDNA、蛋白酶K消化、Sfi1酶切并连接入载体、λ噬菌体的包装,最终获得高滴度、高重组率、插入片段范围大的高质量优秀冰雪运动员血液cDNA文库。此发明属于体育科学、人类资源方法学、细胞生物学及分子生物学的交叉学科领域。 |
申请公布号 |
CN103397390A |
申请公布日期 |
2013.11.20 |
申请号 |
CN201310117912.2 |
申请日期 |
2013.04.08 |
申请人 |
哈尔滨体育学院 |
发明人 |
李滨东;高俊江;范连军;陆涛峰;熊慧;关伟军 |
分类号 |
C40B40/08(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C40B40/08(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种优秀冰雪运动员血液cDNA文库构建方法:1)此方法的创新点:在于滴度高,重组率高,插入片段范围大。要求的cDNA文库,其滴度高于107pfu/ml,最优选高于1010pfu/ml;cDNA文库重组率高于90%,优选高于97%;其插入片段范围在0.1kb‑5.0kb之间,最优选在0.3kb‑2.0kb之间。2)此方法的主要实验步骤:(1)取优秀冰雪运动员新鲜血液;(2)提取总RNA;(3)合成双链cDNA;(4)蛋白酶K消化;(5)Sfi1酶切并连接入载体;(6)λ噬菌体的包装。 |
地址 |
150008 黑龙江省哈尔滨市南岗区大成街1号 |