一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用

摘要

本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.5，最适温度35℃，Mn2+可以使酶比活力提高20％以上，而外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有20g/L的谷氨酸钠pH8.5的缓冲液中，35℃转化12h可以生成8.3g/L的α-酮戊二酸。

主权项

一种产L‑谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法，其特征如下：1)通过构建重组质粒，将谷氨酸氧化酶基因表达于E.coli BL21中构建重组菌株，该菌株具有产生L‑谷氨酸氧化酶的能力；2)菌株产生的L‑谷氨酸氧化酶是包涵体，没有蛋白质活性。