| 主权项 |
一种复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：包括体积比为1:1的黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液，其中黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液分别是指培养黑曲霉和黄孢原毛平革菌得到的培养原液、由培养原液离心得到的培养原液离心上清液、将培养原液经过破碎得到的破碎液或将破碎液离心得到的破碎离心上清液，其中黑曲霉培养原液和黄孢原毛平革菌培养原液分别通过以下步骤制备得到：1）黑曲霉：a、富集培养：将黑曲霉接种于黑曲霉培养基中28℃培养3d；b、适应性培养：将富集培养的黑曲霉培养基菌液接种于1号培养基中，28℃培养3d后，将1号培养基菌液接种于2号培养基中，28℃培养3d后，再把2号培养基菌液接种于3号培养基中，28℃培养3d；c、再次富集培养：再将3号培养基菌液接种到黑曲霉培养基，在160rpm，28℃的条件下培养3d后；d、活性培养：再将步骤c所得的黑曲霉培养基菌液接种到黑曲霉培养基中，在160rpm，28℃的条件下培养2‑4d；所述黑曲霉培养基配方为：20%马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH2PO43g，MgSO4·7H2O1.5g，维生素B1 8mg，pH=6，其中20%马铃薯汁的配制方法为：取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1号培养基配方为：90体积%黑曲霉培养基和10体积%煤泥水混合；所述2号培养基配方为：70体积%黑曲霉培养基和30体积%煤泥水混合；所述3号培养基配方为：40体积%黑曲霉培养基和60体积%煤泥水混合；2）黄孢原毛平革菌：a、富集培养：将黄孢原毛平革菌接种于黄孢原毛平革菌培养基中，28℃培养7d；b、适应性培养：将富集培养的黄孢原毛平革菌培养基菌液接种于1’号培养基中，28℃培养7d后，将1’号培养基菌液接种于2’号培养基中，28℃培养7d后，再把2’号培养基菌液接种于3’号培养基中，28℃培养7d；c、再次富集培养：再将3’号培养基菌液接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28℃的条件下培养7d；d、活性培养：再将步骤c所得黄孢原毛平革菌培养基菌液接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28℃的条件下培养2‑4d；所述黄孢原毛平革菌培养基配方为：20%马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH2PO4 3g，MgSO4·7H2O 1.5g，维生素B1 8mg，pH=6，其中20%马铃薯汁的配制方法为：取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1’ 号培养基配方为：90体积%黑曲霉培养基和10体积%煤泥水混合；所述2’号培养基配方为：70体积%黑曲霉培养基和30体积%煤泥水混合；所述3’号培养基配方为：40体积%黑曲霉培养基和60体积%煤泥水混合。 |
