| 摘要 |
El objeto de la presente solicitud es un método cromatográfico de exclusión molecular que permite una cuantificación exacta de partículas del virus de la fiebre aftosa (VFA) completas, en el proceso de producción. Este método puede ser aplicado en muestras de sobrenadante de un cultivo de células infectadas, semielaborados, bancos de antígenos y vacunas. Mediante este método cromatográfico puede ser evaluada la estabilidad y la potencia de antígenos, bancos de antígenos y vacunas conteniendo VFA, resultando así particularmente apto en la formulación y fabricación de productos para prevenir la fiebre aftosa. Reivindicación 1: Un método de cromatografía líquida para cuantificar partículas de Virus de Fiebre Aftosa (VFA) completas caracterizado porque comprende las siguientes etapas: a) preparar un estándar de VFA; b) inyectar una muestra de VFA purificado (estándar) en una columna cromatográfica de exclusión molecular apropiada para separar partículas en un rango de exclusión de entre 20 a 50 nm y pesos moleculares entre los 105 a 107 Dalton; c) analizar el perfil cromatográfico a 250 - 280 nm; d) determinar el tiempo (o volumen) de elución del pico único correspondiente al VFA; e) inyectar muestras o suspensiones conteniendo VFA en una columna cromatográfica de exclusión molecular según se describe en a); f) analizar el perfil cromatográfico a 250 - 280 nm; g) opcionalmente analizar el perfil cromatográfico con detectores preferentemente de Dispersión Dinámica de Luz (DLS), Dispersión Quasi-elástica de Luz (QELS), Viscosidad intrínseca o Densidad Molecular. Determinar la integridad o deficiencias de la integridad que permitan evaluar los estadios preeliminares de la pérdida de estabilidad del antígeno de VFA mediante los resultados obtenidos en c), d) y g). |
