利用RT-LAMP技术快速检测高粱花叶病毒

摘要

本发明提供了一种快速检测高粱花叶病毒的技术。利用这一技术可以快速的、特异的诊断出甘蔗生长过程中的高粱花叶病毒，属于农业科学技术领域。根据NCBI上提供的高粱花叶病毒的序列设计4条RT-LAMP特异引物(F3、B3、FIP、BIP)，样品提取RNA后进行RT-LAMP反应，通过对反应体系的设计和优化，在一个恒温水浴锅反应1h可以完成扩增，扩增产物可以通过电泳或者荧光染料实现检测，是一种操作简单、快速、灵敏而经济的检测方法。

主权项

利用RT‑LAMP快速检测高粱花叶病毒，其特征是：根据高粱花叶病毒的保守序列设计RT‑LAMP检测的特异性引物共2对：一对外引物F3、B3和内引物FIP、BIP，在61‑63℃条件下恒温反应60‑80min，利用电泳或者荧光染料的方法可以检测高粱花叶病毒，所述的RT‑LAMP反应的“特异性引物”序列是以下4条引物：F3：5‑GACCATGATGGATGGAGAW‑3B3：5‑AAGTCGGTCWAGTTTCGC‑3FIP：5‑TCACTTTAGTGATGCAGCTGAAG‑TGAAGTCCGTATCTTGGC‑3BIP：5‑TGCATAATCTGCCTAAATGRTGGAG‑GAACAAAGAACATTTCCTTTAAAGC‑3。