发明名称 |
一种提取棉花干种子基因组DNA的方法 |
摘要 |
本发明提供了一种适用于棉花干种子基因组DNA快速提取的方法,包括步骤:1)取棉花干种子胚于200μL96孔PCR板中;2)向棉花干种子胚中加入DNA提取缓冲液,置于94℃15-20min;3)弃上清,重复步骤2)一遍;4)向棉花干种子胚中加入ddH2O稀释,即可用于PCR扩增分析。本发明方法从基因组DNA提取到SSR-PCR扩增,最后电泳,进行谱带分析,整个过程仅需4.5~5h。本发明提供的一种棉花干种子DNA快速提取方法,成本低、速度快、操作简单,适用于批量化DNA的提取,且整个提取过程无毒、无污染,是一种资源节约型和环境友好型的高效提取方法,适用于大批量样本的SSR分子标记鉴定工作。 |
申请公布号 |
CN103382470A |
申请公布日期 |
2013.11.06 |
申请号 |
CN201310272540.0 |
申请日期 |
2013.07.01 |
申请人 |
湖北惠民农业科技有限公司;湖北省农业科学院粮食作物研究所 |
发明人 |
郎需勇;游艾青;别传述;刘立清;刘定富;刘伟霞;杨亮 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 |
代理人 |
王健 |
主权项 |
本发明的一种提取棉花干种子基因组DNA的提取方法,包括以下步骤:1) 取棉花干种子胚于200μL 96孔PCR板中;2) 向装有棉花干种子胚的PCR板的每个孔中加入50μL DNA提取缓冲液,然后于94℃保持 15~20min;3) 弃上清,重复步骤2)一遍得到棉花干种子基因组DNA原液;4) 向装有棉花干种子胚和提取缓冲液的PCR板的每个孔中加入150μL ddH2O稀释得到棉花干种子基因组DNA工作液;其中,步骤2)中的提取缓冲液:100mmol/L Tris,pH值8.0; 10mmol/L EDTA,pH值8.0;1mol/L KCl。 |
地址 |
430070 湖北省武汉市洪山区珞狮南路519号明泽丽湾2号楼19-20层 |