发明名称 |
一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用 |
摘要 |
本发明公开了一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用,其步骤:A、StreptomycessahachiroiATCC33158中aziD2基因缺失突变株构建:将用于缺失aziD2基因的重组质粒导入到野生型菌株,获得aziD2基因缺失突变菌株,其总DNA能扩增出1.0kb的特征带;B、aziD2基因表达质粒的构建:aziD2基因表达质粒的构建是基于链霉菌表达质粒进行,用XbaI+SpeI酶切处理aziD2基因片段后,以正确的方向插入到载体组成型强启动子PermE*下游的XbaI位点上,获得aziD2基因的表达质粒;C、aziD2基因互补表达菌株的构建:通过接合转移的方法将aziD2基因表达质粒导入到aziD2基因缺失的菌株中,以互补菌株的总DNA为模板,扩增出1.1kb的特征带,得到互补aziD2基因的菌株WSD2CP。方法易行,操作简便,增强该基因的表达量,从而提高了阿嗪霉素B的产量。 |
申请公布号 |
CN103374541A |
申请公布日期 |
2013.10.30 |
申请号 |
CN201210110348.7 |
申请日期 |
2012.04.16 |
申请人 |
华中农业大学 |
发明人 |
何璟;王珊 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/465(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种阿嗪霉素的基因工程菌WSD2CP,其特征在于:Streptomyces sahachiroi菌株WSD2CP,CCTCC,CCTCC M2012098。 |
地址 |
430070 湖北省武汉市洪山区狮子山1号 |