春石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种春石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：1)外植体的选择和消毒，2)原球茎的诱导培养，3)原球茎的增殖与分化，4)壮苗与生根培养，5)试管苗移栽。采用本发明方法进行春石斛兰组织培养快速繁殖种苗，培养程序简单，外植体无污染，繁殖系数大，生产成本低，种苗质量高，克服现有技术中繁殖系数低等缺陷。

主权项

一种春石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，以春石斛兰八分熟的蒴果种子为外植体，采用培养基诱导生成原球茎从而进行离体快速繁殖，具体包括以下步骤：1)外植体的准备和消毒：将春石斛兰人工授粉后进行套袋，90～110天后待其八分成熟，摘取其蒴果，在超净工作台上，用75％(体积比)酒精消毒30～60s后，再用15～20％(体积比)次氯酸钠溶液浸泡、无菌水冲洗；2)原球茎的诱导培养：用无菌吸水纸吸干消毒后的春石斛兰蒴果表面水分，用解剖刀切开蒴果，挑取石斛兰种子，接种于诱导培养基上进行暗培养，20～30d后转移至光照下培养，继续培养40‑50d后逐渐萌发成圆锥状的原球茎；3)原球茎的增殖与分化：将原球茎转接于增殖与分化培养基中，萌发、分化成大量不定芽；4)壮苗与生根培养：将不定芽切成单芽，接种于壮苗与生根培养基中，培养得生根试管苗；5)试管苗的移栽：将生根试管苗带瓶盖置于常温条件下炼苗5～7d，打开瓶盖再炼苗2～3d，将生根试管苗从培养瓶中轻轻取出，洗去基部残留的培养基，移栽于以苔藓为基质的穴盘，浇水后保持温度25±2℃，空气湿度70～80％。