应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法

摘要

本发明公开了一种应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法。中药样品中的农药残留用乙腈提取，无机氧化铝膜超滤分离，固相分散萃取净化，全二维气相色谱-飞行时间质谱检测。全二维气相色谱采用两支极性不同的色谱柱对中药基质中的基质和待测组分的进行正交分离，并在调制解调器的作用下进入飞行时间质谱完成定性定量检测，外标法定量。本发明方法具有快速、简便，灵敏度高、分离效果好，节省试剂、定性定量准确可靠等特点，解决了复杂基质如中药中农药残留的分离及同时定性和定量的难题。

主权项

一种应用膜分离和全二维气相色谱‑飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1）中药样品中农药残留的乙腈提取 称取1～2g中药粉末样品，加入2～4mL蒸馏水使中药润湿，加入10mL乙腈，剧烈震摇，得到由中药基质、水、乙腈组成的混合匀浆溶液，在上述匀浆溶液中加入1g氯化钠固体，再剧烈震摇，然后进行离心操作，静置分层，取出上清液，离心管中再加10mL乙腈，重复提取一次，合并2次提取液； 2）氧化铝无机膜的超滤分离 氧化铝无机膜膜厚0.02～0.2μm,固定于溶液过滤接收装置上，加样前先用乙腈润湿，真空抽滤，弃去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽滤至膜面近干，再加入10mL乙腈抽滤洗膜，接收液转入旋转蒸馏瓶中旋转蒸发近干，加入1mL丙酮于蒸馏瓶中溶解待测样品； 3）样品提取溶液的固相分散萃取净化 在2mL离心管中分别加入150～300mg无水硫酸镁，50～100mgN‑丙基‑乙二胺，100～200mg石墨碳黑，再加入1mL待测物丙酮溶解液，再进行震荡离心取上清液，上清液过0.22μm有机滤膜，即得到样品溶液； 4）用二维气相色谱‑飞行时间质谱检测 a）标准溶液的制备:分别准确称取标准品农药，用甲苯或甲苯‑丙酮混合液溶解并配成1mg/mL的储备液，使用时再根据各农药的响应，用乙腈稀释成标准工作液； b）使用二维气相色谱‑飞行时间质谱仪检测标准溶液和样品溶液：由自动进样器分别吸取标准工作液和样品溶液，注入二维气相色谱‑飞行时间质谱仪中，样品溶液中农药组分和部分中药基质经一维色谱柱分离后，经双喷口4通道调制解调器加热冷却后进入二维气相色谱柱再分离，飞行时间质谱全扫描检测； 所述二维气相色谱条件： 一维柱为非极性柱：30m×0.25mm×0.25μm+5m×0.25mm、5%diphenyl/95%dimethylpolysiloxane； 二维柱为中极性柱Rtx‑200：2.0m×0.18mm×0.20μm、trifluoropropylmethyl polysiloxane； 载气：He,流速1.0ml/mL,进样2μL，不分流进样，进样口温度：250℃； 一维色谱柱升温程序：40℃保持1min，以30℃／min的速度升至130℃，再以10℃／min的速度升至280℃保持10分钟，整个运行时间为29分钟； 二维色谱柱起始温度比一维高15℃，55℃保持1min，以30℃／min的速度升至145℃，再以10℃／min的速度升至295℃保持10分钟； 调制解调器温度比二维温度高40℃，95℃保持1min，以30℃／min的速度升至185℃，再以10℃／min的速度升至330℃保持10分钟，调制周期为4s，其中热吹0.8秒，冷吹1.2秒； 质谱条件：质量分析器：飞行时间质谱：分辨率：1000；质量范围10‑1000amu，采 集速率：每秒100张图谱以上，离子源：EI源；电离电压70V；离子源温度250℃，传输线温度280℃； 5）结果分析 软件Leco ChromaTOF‑GC v4.32用于数据处理，当样品在EI电离源70V电压的条件下电离时，其质谱图与NIST/PEST He谱库相比对，当相似度大于设定值，该物质被自动识别完成定性，定量离子是软件根据碎片离子的最大丰度自动选定；以标准工作液的质量浓度X为横坐标，定量离子的峰面积Y为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行单离子外标法定量；用标准曲线和定量离子一维和二维保留时间设定定量处理方法，当样品中的定量离子的信噪比大于设定值，一维保留时间偏差在6～10ms，二维保留时间偏差在0.1～0.5ms内，样品被设定的定量处理方法自动定量。