一种四倍体萝卜的育种方法

摘要

本发明涉及一种萝卜的育种方法，尤其是一种四倍体红心红皮萝卜的育种方法，属于植物育种技术领域。本发明的方法主要是将灭菌后的红皮红心萝卜种子，接种到MS发芽培养基上发芽，然后将无菌苗接入含秋水仙碱的MS液体诱导培养基中进行培养后再接入到不含秋水仙碱的固体分化培养基中培养，至分化生成再生芽，切取再生芽接种至生根培养基上生根培养，经炼苗和移栽，得到再生植株。经检测，所得的四倍体红心红皮萝卜与其同源二倍体相比在植株生长的各个阶段均具优势。其有益效果是：提高了红心红皮萝卜的产量的同时提高红心红皮萝卜的红色素含量，具有广阔的市场前景。

主权项

一种四倍体红心红皮萝卜的育种方法，包括以下步骤： 步骤一、选取健康饱满的红心红皮萝卜种子，表面消毒后，用氯化汞溶液浸泡处理12‑15分钟，再用无菌水冲洗干净；步骤二、将无菌的红心红皮萝卜种子接种至MS发芽培养基，在25±3℃、14±2 h•d‑1的条件下培养3‑5天，得到无菌红心红皮萝卜苗；步骤三、将无菌红心红皮萝卜苗切取接种至MS液体诱导培养基中，在14±2h•d‑1光照下振荡诱导培养12～72小时；步骤四、将诱导培养过的无菌红心红皮萝卜苗接种至固体分化培养基中，在25±3℃、光照时间为14±2 h•d‑1、光照强度为2000±1000lux的条件下培养，直至分化，生成再生芽；步骤五、切取再生芽接种至生根培养基，经炼苗后移栽至田间，得到再生植株，即四倍体红心红皮萝卜植株；其中，所述MS发芽培养基、MS液体诱导培养基、固体分化培养基和生根培养基中均含有MS培养基，所述的MS培养基，以1L计，组成为：NH4NO3 1650mg，KNO3 1900mg，CaCl2•2H2O 440mg，KH2PO4 170mg，MgSO4•7H2O 370mg，FeSO4•7H2O 27.8mg， Na2EDTA 37.3mg，H3BO3 6.2mg，MnSO4•H2O 16.9mg，ZnSO4•7H2O 8.6mg，Na2MoO4•2H2O 0.25mg，CuSO4•5H2O 0.025mg，CoCl2•6H2O 0.025mg，KI 0.83mg，肌醇100mg，甘氨酸2mg，烟酸0.5mg，维生素B1 0.1mg，维生素B6 0.5mg和余量的无菌水；所述红心红皮萝卜种子选取纯合二倍体红心红皮萝卜种子；所述MS发芽培养基是由MS培养基1L、蔗糖20g～30g和8g～9g琼脂组成，pH为5.8～6.0；所述MS液体诱导培养基由MS培养基1L、0.1～0.2 mg NAA 、5.0mg ～6.0mg 6‑BA、50mg～200 mg 秋水仙碱组成，pH5.8～6.0；所述固体分化培养基由MS培养基1L、0.1mg～0.2 mg NAA 、5.0 mg～6.0mg 6‑BA、20 g～30g蔗糖、8～9g琼脂组成，pH5.8～6.0；所述生根培养基由MS培养基1L、0.2～0.3 mg NAA 、20 g～30g蔗糖、8～9 g琼脂组成，pH5.8～6.0。