一种双功能配基的壳聚糖基膨胀床吸附介质及其制备方法

摘要

一种双功能配基的壳聚糖基膨胀床吸附介质及其制备方法，涉及一种吸附介质及其制备方法。基质为壳聚糖/不锈钢粉复合微球，配基为经苯甲醛活化后引入的苯基和环氧氯丙烷活化后再偶联的亚氨基二乙酸。采用反相悬浮交联法，制备壳聚糖/不锈钢粉复合微球作为空白基质；采取两种配基分开设计的方法，先将微球基质C2位苯甲醛化，构建一个疏水相互作用配基，再用环氧氯丙烷活化基质C6位羟基，再和亚氨基二乙酸偶联，得到以苯基和亚氨基二乙酸为配基用于蛋白质分离的膨胀床吸附介质。本发明所研制的新型膨胀床吸附介质，同时具有金属螯合亲和配基和疏水作用配基，提高对料液中目标蛋白质的吸附分离效率及选择性，可用于蛋白质的规模化分离纯化。

主权项

一种双功能配基的壳聚糖基膨胀床吸附介质的制备方法，其特征在于：该方法包括如下过程：首先将质量分数为5%的壳聚糖溶液与不锈钢粉、PEG2000充分混合，PEG2000和不锈钢粉在混合物中的质量百分含量分别为3%和6%~40%，再加入与壳聚糖溶液等体积的液体石蜡及乳化剂span‑80，高速搅拌30min使体系成乳液状，然后加入0.12倍壳聚糖溶液体积的甲醛，搅拌1h后将乳液倒入10﹪NaOH/无水乙醇的混合液中静置2h，用二甲苯、无水乙醇、去离子水充分洗涤，筛分得到粒径50~300μm的壳聚糖/不锈钢粉复合微球作为基质；其次将复合微球、甲醇、苯甲醛混合，苯甲醛添加的体积量为复合微球体积的0.3~1倍，60℃下200rpm摇床中反应8~16h，再加入硼氰化钠室温反应12h，抽滤，用去离子水洗涤后得苯甲醛化基质；然后将苯甲醛化基质、0.2mol/L的NaOH水溶液、2~4倍基质微球体积的环氧氯丙烷混合，50℃反应6h，抽滤、洗涤，得环氧基活化基质；最后将环氧基活化基质、1mol/L的Na2CO3溶液、1~2倍环氧基活化基质质量的亚氨基二乙酸混合，使体系pH值始终保持在10，在70℃下200rpm摇床中反应8~16h，抽滤，水洗至中性，得到以苯基和亚氨基二乙酸为配基用于蛋白质分离的膨胀床吸附介质。