一种多表位TK1抗体的制备及其在肿瘤患者早期复发风险及预后评估中的应用

摘要

本发明提供了一种人宫颈癌细胞TK1单体N端23肽、C端20肽和C端28肽组成的抗原决定簇制备的一种高特异性、高灵敏度的配位组合抗人TK1抗体以及其在肿瘤诊断中的应用。抗原决定簇所包含的氨基酸序列为：N端23肽(3-25)：CINLPTVLPGSPSKTRGQIQVIL、C端20肽(206-225)：CPVPGKPGEAVAARKLFAPQ、C端28肽(198-225)：AGPDNKENCPVPGKPGEAVA ARKLFAPQ。本发明同时提供了应用该抗原制备抗体的方法，所提供的抗体试剂盒具有灵敏度高，特异性高，成本低廉等特点，通过增强化学发光点印迹检测法和免疫组化检测及检测试剂盒对对肿瘤康复人群进行定期监控，对其复发和转移风险及预后进行评估。

主权项

一种高特异性、高灵敏度的多表位抗人TK1‐IgY组合抗体的制备方法，其特征在于， 分别将人宫颈癌细胞TK1单体N端23肽（3‑25）：CINLPTVLPGSPSKTRGQIQVIL、C端20肽（206‐225）：CPVPGKPGEAVAARKLFAPQ和C端28肽（198‐225）：AGPDNKENCPVPGKPGEAVAARKLFAPQ与KLH交联，分别免疫母鸡，提取卵黄液体,采用水萃取制备抗体溶液,分别用所述的N端23肽、C端20肽，C端28肽制备的亲和层析柱纯化抗体，初筛出高特异性、高灵敏度的单一抗体； 所述的抗人TK1‐IgY组合抗体由按质量百分数计下述抗体组成：所述23肽免疫的单一抗体为30%～45%，所述20肽免疫的单一抗体为25%～40%，28肽免疫的单一抗体为20%～35%，所述3种抗体的质量百分数之和为100%。