一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法

摘要

本发明公开了一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法。该方法为：菌体经过灭活，两步酶解，最后煮沸的处理后，上清可直接用于PCR反应。本方法制备的样品可有效地扩增基因组上单拷贝、长片段基因。此方法为大规模的酵母筛选和鉴定提供了新的途径。

主权项

一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法，其特征在于：首先将酵母菌体悬浮于溶液中作为样品，灭活处理，再先后加入不同的两种酶处理，最后将样品溶液煮沸，取上清直接作为PCR反应的模板；先加入的所述酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、β‑1，3‑甘露聚糖酶、β‑葡聚糖酶、α‑1，4‑葡聚糖酶中的一种；酶处理条件为温度25℃～55℃，时间5min～2h，酶用量0.01U/107个细胞～5U/107个细胞；后加入的所述酶为蛋白酶、蛋白酶K、磷脂酶、蜗牛酶、几丁质酶中的一种；酶处理条件为温度25℃～55℃，时间5min～2h，酶用量0.1U/107个细胞～4U/107个细胞。