发明名称 |
哈工大异养硝化不动细菌L7产低温羟氨氧化酶的方法及其分离纯化方法 |
摘要 |
哈工大异养硝化不动细菌L7产低温羟氨氧化酶的方法及其分离纯化方法,它涉及产酶的方法及其分离纯化方法。产酶:L7菌株接种到产酶培养基中培养。分离纯化:一、L7菌株接种到产酶培养基中培养,收集菌体;二、菌体破碎,制备不含溶菌酶的胞外基质;三、对胞外基质进行分离,平衡,洗脱,层析,电泳,收集单体蛋白即完成。本发明中产酶培养基接种L7菌株的产酶量高,活性稳定,15℃时酶活性最高,产酶量最高。本发明中的分离纯化方法,所得低温羟氨氧化酶是分子量60.4KDa的单体蛋白,在2~25℃,pH值7.5~8.5酶活性稳定,可有效去除低温水中氨氮。 |
申请公布号 |
CN103374556A |
申请公布日期 |
2013.10.30 |
申请号 |
CN201310201283.1 |
申请日期 |
2013.05.27 |
申请人 |
哈尔滨工业大学 |
发明人 |
李伟光;张多英;黄晓飞;秦雯 |
分类号 |
C12N9/06(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/06(2006.01)I |
代理机构 |
哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 |
代理人 |
金永焕 |
主权项 |
哈工大异养硝化不动细菌L7产低温羟氨氧化酶的方法,其特征在于它按以下步骤进行:将哈工大异养硝化不动细菌L7(Acinetobacter Heteronitrifihit L7)菌株接种到产酶培养基中,接种量为2%,在160rpm/min、15℃培养14~24h,即完成哈工大异养硝化不动细菌L7产低温羟氨氧化酶;其中产酶培养基的组分如下:NH4Cl0.1g/L、CH3CH2ONa1.0g/L、NH2OH0.7g/L、MgSO4·7H2O0.05g/L、K2HPO40.2g/L、NaCl0.12g/L、CuSO4·5H2O0.01g/L、NaMoO4·2H2O0.05g/L、BaCl20.01g/L、MnSO4·4H2O0.01g/L、FeSO40.01g/L、K[Fe(CN)6]0.01g/L、Cty C0.02g/L和余量的蒸馏水,pH值7.0~7.4。 |
地址 |
150001 黑龙江省哈尔滨市南岗区西大直街92号 |