发明名称 酸性橙Ⅱ人工抗原合成及酸性橙Ⅱ-IgY抗体制备方法
摘要 本发明公开了一种酸性橙Ⅱ人工抗原合成的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)称取酸性橙Ⅱ,加入丙酮溶解,再加入丁二酸酐、无水吡啶,加热回流24h;(2)旋蒸除去丙酮,干燥后可见蒸馏烧瓶底部一层橙色,加DMF溶解,再加入NHS、DCC,室温下在磁力搅拌器上搅拌,获得反应液,离心,去沉淀,制成酸性橙Ⅱ活化中间产物;(3)称取BSA或OVA,溶于PBS中,在磁力搅拌器上边搅拌边将酸性橙Ⅱ活化中间产物逐滴加入到BSA-PBS或OVA-PBS溶液中,搅拌过夜;(4)次日将搅拌过夜的反应液置于透析袋中,在冰箱内以PBS中透析72h,每8h换透析液一次;(5)透析结束后,将透析袋内液体离心,去沉淀,即得酸性橙Ⅱ人工抗原。
申请公布号 CN103360489A 申请公布日期 2013.10.23
申请号 CN201310341658.4 申请日期 2013.08.07
申请人 西北农林科技大学 发明人 张小莺;何金鑫;杨文静
分类号 C07K14/765(2006.01)I;C07K14/77(2006.01)I;C07K1/107(2006.01)I;C07K16/44(2006.01)I;C07K16/02(2006.01)I 主分类号 C07K14/765(2006.01)I
代理机构 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人 汤东凤
主权项 一种酸性橙Ⅱ人工抗原合成的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)称取酸性橙Ⅱ7mg,加入丙酮5ml溶解,再加入丁二酸酐4mg、无水吡啶1mg,60℃加热回流24h;(2)旋蒸除去丙酮,干燥后可见蒸馏烧瓶底部一层橙色,加DMF2ml溶解,再加入NHS2mg、DCC8.3mg,室温下在磁力搅拌器上搅拌24h,获得反应液,将反应液以2000r/min离心10min,去沉淀,制成酸性橙Ⅱ活化中间产物;(3)称取BSA13.3mg或OVA8.6mg,溶于2ml,pH为7.4的PBS中,在磁力搅拌器上边搅拌边将酸性橙Ⅱ活化中间产物逐滴加入到BSA‑PBS或OVA‑PBS溶液中,4℃搅拌过夜;(4)次日将搅拌过夜的反应液置于的透析袋中,4℃冰箱内pH为7.4的PBS中透析72h,每8h换透析液一次;(5)透析结束后,将透析袋内液体离心,去沉淀,即得酸性橙Ⅱ人工抗原。
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