一种人IL-12亲和纯化层析柱、其制备方法及利用其纯化重组人IL-12的方法

摘要

本发明涉及一种制备重组人IL-12亲和纯化层析柱的工艺、由该工艺制得的重组人IL-12亲和纯化层析柱、及用该亲和纯化层析柱纯化重组人IL-12的方法。具体地说，本发明涉及用抗人IL-12的杂交瘤细胞株制备抗人IL-12单克隆抗体，并用该抗体制备重组人IL-12亲和纯化层析柱，然后用该亲和纯化层析柱纯化重组人IL-12的工艺流程。更具体地说，本发明涉及一种采用亲和层析柱纯化重组人IL-12的方法，其特征在于用抗人IL-12单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备抗体，用该抗体制备人IL-12亲和纯化层析柱，然后以该亲和纯化层析柱为基础进行纯化重组人IL-12的方法。

主权项

一种利用抗人IL‑12的单克隆抗体制备人IL‑12亲和纯化层析柱的方法，所述方法包括下述步骤：a.活化凝胶预处理：取适量的活化凝胶，用1mM HCl进行完全溶解，并用1mM HCl冲洗胶体，然后再用0.1M NaHCO3，冲洗胶体；b.抗rhIL‑12抗体的偶联及亲和层析柱的制备：通过超滤浓缩的方法将抗rhIL‑12抗体浓缩至4‑5mg/ml，然后将抗rhIL‑12抗体加入活化凝胶中，置4℃过夜，然后用0.1M NaHCO3冲洗胶体，用0.1M Tris‑HCl缓冲液封闭未结合的活性基团，然后用0.1M Tris‑HCl缓冲液和0.1M醋酸‑醋酸钠缓冲液交替冲洗胶体，最后将结合抗rhIL‑12抗体的胶体装柱，制备成纯化rhIL‑12的亲和层析柱。