含有内标的金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物、试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了含有内标的金黄色葡萄球菌LAMP检测引物、检测试剂盒和检测方法。引物为SEQ ID NO1-SEQ ID NO12，包括检测引物组及内标引物组；检测试剂盒包括引物组、反应液、DNA聚合酶、阳性对照和内标。其检测方法是通过提取待检样品，在63～65℃对样品模板进行45-60分钟的扩增，不仅可检测待检样品是否含有金黄色葡萄球菌，同时可根据检测内标引物组是否有扩增来判断是否有假阴性检测结果。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、适合现场检测等优点，并且可有效防止假阴性的发生，适于推广应用。

主权项

一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测方法，使用了检测引物组及内标引物组，可根据检测内标引物组是否有扩增来判断是否有假阴性检测结果，其中，检测引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物，其核苷酸序列分别如下所示：SAnuc‑F3：ACAAACAGATAACGGCGTAA（SEQ ID NO:1）；SAnuc‑B3：CCAAGCCTTGACGAACTAA（SEQ ID NO:2）；SAnuc‑FIP：AGGATGCTTTGTTTCAGGTGTAAGCGATTGATGGTGATACG（SEQ ID NO:3）；SAnuc‑BIP：GCCCTGAAGCAAGTGCATTTACGCATAAATATACGCTAAGCCAC（SEQ ID NO:4）；SAnuc‑LF：TCTGAATGTCATTGGTTGACCT（SEQ ID NO:5）；SAnuc‑LB：GAAGTCGAGTTTGACAAAGGTC（SEQ ID NO:6）；内标引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物，其核苷酸序列分别如下所示：SAfemA2‑F3：CGCATAACAAGCGAGATAAC（SEQ ID NO:7）；SAfemA2‑B3：AGCATCTTCAGCATCTTCTG（SEQ ID NO:8）；SAfemA2‑FIP：TGCATTTGATGTACCACCAGCACGTCTACAAGAAGAACATGGT（SEQ ID NO:9）；SAfemA2‑BIP：TCCGTCATTTTGCCGGAAGTTATAACGGTCAATGCCATGATT（SEQ ID NO:10）；SAfemA2‑LF：GAAGAAACCAGCAGAGATAGGT（SEQ ID NO:11）；SAfemA2‑LB：GCAGTGCAATGGGAAATGATTA（SEQ ID NO:12）。