发明名称 一种稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途
摘要 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域,涉及一种能够稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT,定点诱变为阿德福韦耐药基因型A181V后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-A181V,转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选,建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS181V。该细胞株的保藏编号:CGMCC No.5829,分类命名:人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株能持续表达HBsAg及HBeAg,胞内有HBV复制,并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系HepG2.HS181V表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15,细胞上清HBV颗粒水平低于HepG2.2.15。能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。
申请公布号 CN103361315A 申请公布日期 2013.10.23
申请号 CN201210103603.5 申请日期 2012.04.10
申请人 复旦大学附属华山医院 发明人 张继明;张轶俊
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N 主分类号 C12N5/10(2006.01)I
代理机构 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人 吴桂琴
主权项 一种稳定表达HBV耐药变异株细胞系,其特征是,所述细胞为稳定表达HBV耐药变异株HepG2.HS181V,保藏编号:CGMCC No.5829,分类命名:人肝癌细胞株;具有以下生物学特性:1)能持续表达HBsAg及HBeAg,胞内有HBV复制,能产生感染性HBV颗粒;2)表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15,细胞上清HBV颗粒水平低于HepG2.2.15。
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