一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法

摘要

一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法，它涉及生物学领域，电动载物台的下方设置有物镜，电动载物台的上方设置有培养室平皿，培养室平皿内底部设置有载玻片，载玻片上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层，聚二甲基硅氧烷薄层上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条，胶条上覆盖有盖玻片。它克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。

主权项

1.高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置，其特征在于它的筛选装置包含载玻片(1)、聚二甲基硅氧烷薄层(2)、盖玻片(3)、胶条(4)、物镜(5)、电动载物台(6)和培养室平皿(7)，电动载物台(6)的下方设置有物镜(5)，电动载物台(6)的上方设置有培养室平皿(7)，培养室平皿(7)内底部设置有载玻片(1)，载玻片(1)上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层(2)，聚二甲基硅氧烷薄层(2)上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条(4)，胶条(4)上覆盖有盖玻片(3)。2.高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的方法，其特征在于采用权利要求1所述的高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置，具体筛选方法为：（1）先用聚二甲基硅氧烷覆盖载玻片表面并在通风橱中静置形成疏水界面，取50μl浓度为10⁵cellml¹的细胞悬液与等体积基质混匀；（2）用微量移液器取10-20μl混合液，将细胞混合液依次均匀点至载玻片样品观察区域形成矩阵，以5×5矩阵为例，观察区域为1.5cm，样品直径1.2mm，样品间距为3mm，单个样品高度为0.5mm，或者根据研究所需量身定制样品观察区从而形成数量不等的样品矩阵；（3）将矩阵静置凝结，盖上盖玻片，然后置于配备电动载物台的显微镜下，通过电动载物台及物镜定义每个矩阵点所在位置，通过自动照相系统每隔一定时间间隔获取图像，从而获得细胞在各种三维基质中的生长、迁移状态，并高通量筛选各种细胞外基质对细胞生长、迁移行为的影响。