PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用

摘要

PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用，涉及一种重组质粒。所述构建方法：1)将PSG5-Myc-Fbw7质粒谱图信息与PcDNA3.1(+)质粒谱图信息比较，确定双酶切位点EcoR Ⅰ和NotⅠ；2)双酶切PSG5-Myc-Fbw7质粒；3)双酶切PcDNA3.1(+)质粒载体；4)通过琼脂糖凝胶电泳鉴定双酶切效率，将质粒载体PcDNA3.1(+)和目的基因Fbw7全长进行连接；5)将重组质粒转化感受态细菌，筛选阳性克隆，并进行测序鉴定，抽提PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒。所述PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒可用于制备治疗人胆管癌肿瘤药物。

主权项

PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒，其特征在于是通过提取人Fbw7基因全长，以含新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)质粒为载体，在PcDNA3.1(+)的和限制性酶切位点EcoRⅠ和Not Ⅰ之间插入Fbw7基因全长，构建的一种含Fbw7基因全长和新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒。