主权项 |
1.组合物,其用于形成用于调节SPC功能和骨髓过程的数个步骤的人工骨髓样环境,包含:a]间充质细胞的培养物;b]能够活化a]的细胞中的细胞内信号传导途径的一种造血调节剂或多种造血调节剂;其中所述造血调节剂选自如下中的任一种:生物试剂、化学试剂、免疫试剂及上述试剂的一种或多种的组合;c]培养基,其选自Iscove改良的Dulbecco培养基(IMDM)、Dulbecco改良的eagle培养基(DMEM)、α-最低基础培养基(α-MEM)、RPMI-1640,所述培养基补加有:i)适合的血清或适合的血清替代物;ii)并任选地还补加有在a]的细胞中促进低氧状态造血调节剂、甲基纤维素、促红细胞生成素、干细胞因子(SCF)、造血生长和分化因子、白介素1β、白介素3和白介素6;和d]用于a]的细胞的支持物,所述支持物包含细胞外基质成分或能够在二维或三维上形成基质的它们的模拟物,其中所述单个或多个造血调节剂选自如下表1中所述的造血调节剂并以表1中所列的浓度使用:表1<img file="FSB00001117310700011.GIF" wi="1908" he="989" /><img file="FSB00001117310700021.GIF" wi="1913" he="2911" /><img file="FSB00001117310700031.GIF" wi="2025" he="2911" /><img file="FSB00001117310700041.GIF" wi="2008" he="2913" /><img file="FSB00001117310700051.GIF" wi="1907" he="336" />并且,其中所述造血调节剂的浓度为表1中所述的浓度;选自人血清、胎牛血清或源于哺乳动物源的血清的任何血清以20%-30%体积/体积的范围使用、或使用适合的血清替代物;促红细胞生成素以2IU/ml的范围使用;纯化的生长和分化因子,即,干细胞因子(SCF)以50纳克/ml的浓度使用,以及各20纳克/ml使用的GM-CSF、G-CSF、IL-1β、IL-3和IL-6,甲基纤维素以0.8%wt/wt使用,以及使用IMDM培养基。 |