一种人甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法

摘要

本发明试剂盒涉及一种人甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）的磁微粒化学发光免疫检测方法，属于免疫检测分析技术领域。异硫氰酸荧光素（FITC）标记的TPO抗原和碱性磷酸酶（AP）标记的人IgG抗体结合，形成抗原-抗体-酶标二抗的夹心免疫复合物，类似“三明治”结构。随后加入连有抗FITC抗体的磁性微粒，通过抗FITC抗体与FITC的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁颗粒上，在外加磁场中直接沉淀，不需离心即可将免疫反应形成的复合物与未结合的其它物质分离。本发明试剂盒将化学发光与磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，具有更高的灵敏度、线性范围宽、快速等诸多优点，并降低了产品成本，在临床检验等方面具有广阔的应用前景。

主权项

一种人甲状腺过氧化物酶抗体TPOAb的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于：将羊抗FITC抗体与直径为0.1‑5微米的磁微粒连接组成固相试剂，经捕捉反应体系中的FITC标记抗原、人甲状腺过氧化物酶抗体以及二抗酶标记试剂后形成固相‑抗原‑抗体‑酶标二抗夹心复合物；所述的二抗酶标抗体中使用的酶是碱性磷酸酶AP；所述的二抗酶标试剂的偶联方法是将N‑琥珀酰胺3‑（2‑吡啶二巯基）丙酸活化的抗体与Traunt’s试剂活化的碱性磷酸酶以1:0.5‑2的比例混合，并用凝胶层析柱分离纯化；所使用的底物溶液为含Lumigen APS‑5发光液的缓冲液。