发明名称 |
在Pichia pastoris中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法 |
摘要 |
本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICMP1102中的AOX启动子,构建组成型重组表达载体pGAPMP1102并转化毕赤酵母X-33,获得的重组酵母经发酵培养,能够分泌产生MP1102。本发明首次实现菌丝霉素衍生物MP1102在毕赤酵母中组成型表达,经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到387.6mg/L;发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品,产量为105.84mg/L;经Genetools分析其纯度为95.13%。抑菌实验表明MP1102对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用,MP1102的MIC介于0.0028-0.11μM。本发明所述方法获得的MP1102可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域,具有广阔的应用价值和市场前景。 |
申请公布号 |
CN103333912A |
申请公布日期 |
2013.10.02 |
申请号 |
CN201310244829.1 |
申请日期 |
2013.06.19 |
申请人 |
中国农业科学院饲料研究所 |
发明人 |
王建华;张勇;滕达;王秀敏;毛若雨 |
分类号 |
C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/39(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/81(2006.01)I |
代理机构 |
北京路浩知识产权代理有限公司 11002 |
代理人 |
王朋飞 |
主权项 |
一种表达载体,其特征在于,含有毕赤酵母组成型启动子GAP、位于启动子下游的编码信号肽的核苷酸序列、编码菌丝霉素衍生物MP1102的基因序列和TAA,TAG终止子序列,所述编码MP1102的DNA序列5’端具有酵母Kex2切割识别序列AAGAGA。 |
地址 |
100081 北京市海淀区中关村南大街12号 |