发明名称 |
一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法及其试剂盒 |
摘要 |
本发明涉及一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法及其试剂盒。本发明根据大丽轮枝菌rDNA的ITS区设计一对特异性检测引物dali1/dali2,在大丽轮枝菌特异性检测中扩增出372bp的产物。取2μL DNA模板直接加入荧光定量PCR反应液中进行扩增;反应液中含有该对特异性引物及荧光染料,随着PCR反应的进行,实时检测反应体系的荧光强度,并根据分析软件计算Ct值,从而计算出样品中大丽轮枝菌的数量。本发明的试剂盒操作简便、快速,特异性好,灵敏度高;本发明提供的试剂盒可对大丽轮枝菌进行快速定量检测,可以替代一直沿用的分离培养的传统诊断方法,并适于在植物病害诊断检测领域广泛推广应用。 |
申请公布号 |
CN103333969A |
申请公布日期 |
2013.10.02 |
申请号 |
CN201310321266.1 |
申请日期 |
2013.07.29 |
申请人 |
中国农业科学院植物保护研究所 |
发明人 |
李园;曹坳程;郭美霞;王秋霞;欧阳灿彬;颜冬冬;毛连纲;马涛涛 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 |
代理人 |
胡敬红 |
主权项 |
一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法,以大丽轮枝菌DNA为模板进行PCR反应,其特征在于,所述PCR反应体系中加入有一对特异性引物dali1/dali2,该特异性引物的序列分别为:特异性引物dali1:5’‑CCGCCGGTCCATCAGTCTCTCTG‑3’,特异性引物dali2:5’‑GCTTGTAGGGGGTTTAGAGGCAAGC‑3’。 |
地址 |
100193 北京市海淀区圆明园西路2号 |