一种载脂蛋白B的快速纯化方法

摘要

本发明提供一种载脂蛋白B的快速纯化方法，包括步骤：A）取人血浆，加入缓冲溶液稀释并混匀；B）将得到的稀释血浆样品置于65~75℃的第一水浴中加热后，离心，取上清液；C）往上清液中加入0.5~3%体积分数的表面活性剂，混匀，得到处理后的上清液；D）将处理后的上清液置于50~60℃的第二水浴中加热后，离心，弃上清液，收集沉淀；E）将沉淀用0.01~0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液洗涤两次，抽滤，得到纯化后的载脂蛋白B。本发明提供的载脂蛋白B的快速纯化方法操作步骤简单，所需设备简单，纯化后的产物纯度高，有效降低了纯化成本。

主权项

一种载脂蛋白B的快速纯化方法，其特征在于：包括如下步骤：A）  取人血浆，加入缓冲溶液稀释并混匀后得到稀释血浆样品；B）   将所述稀释血浆样品置于65~75℃的第一水浴中加热，期间每隔5分钟轻轻混匀所述稀释血浆样品一次，水浴加热15~25分钟后，将所述稀释血浆样品于7500~8500g条件下离心10~20分钟，取上清液；C）   往所述上清液中加入0.5~3%体积分数的表面活性剂，混匀后静置3~5小时，得到处理后的上清液；D）  将所述处理后的上清液置于50~60℃的第二水浴中加热，期间每隔5分钟轻轻混匀所述处理后的上清液一次，水浴加热10~30分钟后，将所述处理后的上清液于7500~8500g条件下离心10~20分钟，弃上清液，收集沉淀；E）   将所述沉淀用0.01~0.1mol/L的Tris‑HCl缓冲液洗涤两次，抽滤，得到纯化后的载脂蛋白B；所述表面活性剂采用曲拉通X‑100。