溶肿瘤能力增强的B型人腺病毒Ad11突变体的构建和应用

摘要

本发明涉及B型重组人腺病毒载体Ad11-5EP和Ad11-5ETel-GFP的构建方法及其应用。腺病毒载体Ad11-5EP的构建是利用同源重组将Ad5E1A编码序列上游的365bp段基因(包括Ad5E1A的增强子和启动子)，置换到B型人腺病毒11亚型Ad11的相应区域，构建成载体Ad11-5EP。B型重组人腺病毒载体Ad11-5ETel-GFP的构建方法，是由构建的穿梭载体pSSENTel、pSSGFP与Ad11-5EP基因组同时同源重组产生Ad11-5ETel-GFP。Ad11-5EP载体比野生型Ad11有更强的溶肿瘤作用，增强了对肿瘤细胞的杀伤能力。通过肿瘤生长和肿瘤清除率的测定表明，Ad11-5EP能有效地降低肿瘤的生长速度，并且荷瘤鼠无瘤率显著好于Ad11；构建的Ad11-5ETel-GFP可用于治疗肿瘤或检测血循环中的肿瘤细胞，该载体可特异、敏感、经济的用于循环血液中肿瘤细胞的检测。

主权项

一种B型重组人腺病毒载体Ad11‑5EP的构建方法，其特征是：利用同源重组将Ad5 E1A编码序列上游的365bp段基因，包括Ad5 E1A的增强子和启动子，置换到B型人腺病毒11亚型Ad11的相应区域，构建成B型重组人腺病毒载体Ad11‑5EP。