从生物体液样本中富集与检测稀有细胞的整合方法

摘要

本发明涉及一种从生物体液样本中富集与检测稀有细胞的整合方法，该富集方法包括：a)通过离心去除血浆蛋白，b)可选加入红细胞裂解液进行红细胞裂解以去除红细胞，c)加免疫微球或免疫吸附剂进行孵育，d)进行基于独特的细胞分离介质的密度离心，用于分离循环稀有细胞与去除红细胞后的剩余红细胞及结合于所述免疫微球上的白细胞。根据本发明对富集的稀有细胞进行检测的方法包括进行基于免疫组化的染色与免疫荧光相结合，或基于免疫组化的双色、三色、或多色染色，以及利用荧光或普通光学显微镜或基于显微镜原理的扫描仪进行观察鉴定。该新颖独特的富集与染色方法已被证明成本低，且能快速高效及高特异性地富集并定量检测血中的稀有细胞。

主权项

一种从生物体液样本中富集稀有细胞的整合方法，包括：a)通过离心去除血浆蛋白，b)加入红细胞裂解液进行红细胞裂解以去除红细胞，c)加免疫微球或免疫吸附剂进行孵育，d)进行基于独特的细胞分离介质的密度离心，用于分离所述稀有细胞与去除红细胞后的剩余红细胞及结合于所述免疫微球上的白细胞，其中所述独特的细胞分离介质在20℃温度下比重范围介于1.07256‑1.07638克/毫升，所述细胞分离介质包含下列任何一种或任意两种或两种以上的试剂成份：聚乙烯吡咯烷包被的胶质二氧化硅；多聚糖加泛影酸钠或其衍生物；由蔗糖和表氯醇组成的非离子聚合物；任何一种含糖的溶液；碘化小分子化合物；或任意蛋白溶液，其中所述稀有细胞是指其在采集的生物体液样本内的所有有核细胞中的占有比例小于0.1％，它们包括循环肿瘤细胞，循环内皮细胞，干细胞，及某些免疫细胞。