| 摘要 |
1. Плазмидный вектор pPhoA-frame, который содержит:- фрагмент, кодирующий щелочную фосфатазу E.coli;- фрагмент гена atpE E.coli, содержащий сайт инициации трансляции;- встроенную в ген phoA последовательность, содержащую сайты узнавания эндонуклеаз рестрикции BglII, StuI, ApaI, SacII и предназначенную для клонирования фрагментов гена BRCA1 (полилинкер).2. Способ выявления в гене BRCA1 человека нонсенс-мутаций и мутаций сдвига рамки трансляции, включающий создание рекомбинантных плазмид, отличающийся тем, что используют плазмиды, созданные с использованием плазмидного вектора по п.1, при этом исследуемый фрагмент гена находится в единой трансляционной рамке с геном щелочной фосфатазы E.coli; наличие в исследуемом фрагменте гена мутаций, нарушающих целостность рамки считывания, оценивают визуально по отсутствию окраски колоний клеток E.coli, трансформированных полученной рекомбинантной плазмидой, в присутствии субстрата щелочной фосфатазы. |
