发明名称 利用HTRF筛选高产量稳定细胞株的方法
摘要 本发明公开了一种利用HTRF筛选高产量稳定细胞株的方法,包括步骤:1)在微孔板中,培养表达目标抗体或融合蛋白的细胞株单克隆;2)吸取经培养后的细胞上清,加入筛选微孔板内,并在该孔内加入Human-IGg-XL665和Anti-Human-IGg-Fc-Cryptate,以所要检测的目标抗体或融合蛋白作为标准品进行对照,在室温反应2.5h以上或者过夜,根据HTRF方法原理,检测A665nm/A615nm的吸光度比值,根据该比值,判断细胞株克隆的表达产量。本发明耗时短,通量高,操作简单,结果稳定,可以在短时间内有效的筛选出高表达的细胞株克隆,加快了生物制药行业的进程。
申请公布号 CN103323436A 申请公布日期 2013.09.25
申请号 CN201210073641.0 申请日期 2012.03.20
申请人 无锡药明康德生物技术有限公司 发明人 蔡洁行;徐淑荣;徐亚平;李鹃;李浩强
分类号 G01N21/64(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I 主分类号 G01N21/64(2006.01)I
代理机构 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人 高月红
主权项 一种利用HTRF筛选高产量稳定细胞株的方法,其特征在于,包括步骤:1)在微孔板中,培养表达目标抗体或融合蛋白的细胞株单克隆;2)吸取经培养后的细胞上清,加入筛选微孔板内,并在该孔内加入XL665偶联的人IgG和穴状物偶联的抗人IGg Fc片段的抗体,以所要检测的目标抗体或融合蛋白作为标准品进行对照,在室温反应2.5h以上或者过夜,根据HTRF方法原理,检测A665nm/A615nm的吸光度比值,根据该比值,判断细胞株克隆的表达产量,以筛选出高产量稳定的细胞株。
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