一株过表达次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因的节杆菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一株过表达次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因的节杆菌及其构建方法与应用，克隆了嘌呤补救合成途径的关键酶次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因（hgprt），利用大肠杆菌-节杆菌穿梭质粒构建重组表达质粒。通过电转化的方法，将重组质粒导入节杆菌，通过卡那霉素抗性筛选转化子，然后通过质粒PCR对基因工程菌进行验证，从而构建了重组节杆菌AR-HG。本发明构建的重组节杆菌AR-HG比出发菌株的产量提高16.6%，单位菌体cAMP合成能力提高27.0%，可直接用于cAMP的工业化生产，提高产量降低成本。

主权项

一株过表达次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因的节杆菌，其特征在于，它是利用PCR扩增克隆嘌呤补救合成途径的关键酶次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因hgprt，将上述基因片段连接到过表达载体，然后利用电转化的方法转化节杆菌，通过抗生素抗性筛选获得目的基因的工程菌。