环介导等温扩增禽呼肠孤病毒的引物、禽呼肠孤病毒的检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明涉及禽呼肠孤病毒检测技术领域，特别涉及环介导等温扩增禽呼肠孤病毒的引物，包括三对特异性引物，序列如序列表所示。一种禽呼肠孤病毒的检测试剂盒，包括环介导等温扩增反应液，环介导等温扩增反应液中含有上述三对特异性引物。一种禽呼肠孤病毒的检测方法，使用所述的检测试剂盒对样品RNA进行环介导等温扩增反应，同时设置阳性对照组和阴性对照组，所述环介导等温扩增反应条件为：59-65℃、30-75分钟。本发明的禽呼肠孤病毒检测试剂盒，特异性和敏感性高，可检测出100个拷贝的RNA，操作简单，观察方便。

主权项

一种环介导等温扩增禽呼肠孤病毒的引物，其特征在于共包括外侧引物对、内侧引物对和环形引物对三对特异性引物，序列如下：外侧引物对：上游引物F3：5’‑ ATGCTGCGTATGCCTCCC‑3’,下游引物B3： 5’‑ CCAGCTCACGATGGAAGAC‑3’,内侧引物对:上游引物FIP： 5’‑ ACGTAGCTTGCAAATCACCACCTTTTGTGTAACGGTGCGACTGCT‑3’,下游引物BIP：5’‑ CATAATTGCATATTGGCCTTATCTTTTTTACGTGCAGCGTCCGCCTT‑3’,环形引物对:上游引物LF：5’‑ GCCTGACAATGAACGTTACC‑3’,下游引物LB： 5’‑ AGCGGCGGGTGGTGGTTTC‑3’，外侧引物对、内侧引物对、环形引物对的摩尔比为1:8:4。